成果介紹
本發(fā)明適用于分子定位技術(shù)領(lǐng)域,提供了一種三維納米分辨定位方法,包括:對(duì)物品中的目標(biāo)分子進(jìn)行熒光激發(fā);采用兩個(gè)并行的探測(cè)通道進(jìn)行熒光探測(cè),在每個(gè)探測(cè)通道中,使熒光依次通過(guò)一物鏡及一彎曲光柵采用兩個(gè)并行的探測(cè)通道進(jìn)行熒光探測(cè),在每個(gè)探測(cè)通道中,使熒光依次通過(guò)一物鏡及一彎曲光柵,成像于同一個(gè)探測(cè)器上的不同區(qū)域或分別成像于不同的探測(cè)器上;兩個(gè)探測(cè)通道對(duì)應(yīng)的成像面對(duì)應(yīng)于物品中的共軛面錯(cuò)位分布,間距為1~3μm;采用雙焦面法對(duì)圖像進(jìn)行分析,確定目標(biāo)分子的三維定位信息。本發(fā)明將彎曲光柵多焦面并行成像與雙焦面定位法有機(jī)結(jié)合,在突破現(xiàn)有顯微系統(tǒng)景深的同時(shí),實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞厚度范圍內(nèi)運(yùn)動(dòng)分子的三維納米定位和追蹤。